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pcr試劑盒的使用方法

更新時間:2022-02-11

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   PCR試劑盒原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
  使用方法:
  一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
  1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
  2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
  3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
  4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
  5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
  6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
  7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
  產(chǎn)品及特點:
  1. 即開即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
  2. 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
  3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
  4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
  5. 產(chǎn)品僅用于科研本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
  運(yùn)輸及保存:
  低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
  自備試劑
  DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見使用方法)。
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